¿Cuál es el mejor método?
—Pruebas para el diagnóstico de infección por SARS-CoV-2
Para los casos confirmados de COVID-19, los síntomas clínicos comunes informados incluyen fiebre, tos, mialgia o fatiga.Sin embargo, estos síntomas no son características únicas de COVID-19 porque estos síntomas son similares a los de otras enfermedades infectadas por virus como la influenza.Actualmente, la PCR en tiempo real del ácido nucleico del virus (rt-PCR), la tomografía computarizada y algunos parámetros hematológicos son las principales herramientas para el diagnóstico clínico de la infección.Los CDC chinos han desarrollado y utilizado muchos kits de prueba de laboratorio para analizar muestras de pacientes para COVID-191, CDC de EE. UU.2y otras empresas privadas.La prueba de anticuerpos IgG/IgM, un método de prueba serológico, también se agregó como criterio de diagnóstico en la versión actualizada de China de las pautas de diagnóstico y tratamiento para la nueva enfermedad por coronavirus (COVID-19), que se emitió el 3 de marzo.1.La prueba de rt-PCR de ácido nucleico del virus sigue siendo el método de diagnóstico estándar actual para el diagnóstico de COVID-19.
paso fuerte®Novel Coronavlrus (SARS-COV-2) Multiplex Real-Time PCR Kit (detección de tres genes)
Sin embargo, estos kits de prueba de PCR en tiempo real, que buscan material genético del virus, por ejemplo en hisopos nasales, orales o anales, tienen muchas limitaciones:
1) Estas pruebas tienen largos tiempos de respuesta y son complicadas de operar;generalmente toman en promedio más de 2 a 3 horas para generar resultados.
2) Las pruebas PCR requieren laboratorios certificados, equipos costosos y técnicos capacitados para operar.
3) Hay algunos números de falsos negativos para rt-PCR de COVID-19.Puede deberse a una baja carga viral de SARS-CoV-2 en la muestra de hisopado de las vías respiratorias superiores (el nuevo coronavirus infecta principalmente las vías respiratorias inferiores, como los alvéolos pulmonares) y la prueba no puede identificar a las personas que pasaron por una infección, se recuperaron y limpiado el virus de sus cuerpos.
Investigación de Lirong Zou et al.4encontró que se detectaron cargas virales más altas poco después del inicio de los síntomas, con cargas virales más altas detectadas en la nariz que en la garganta y que el patrón de eliminación de ácido nucleico viral de los pacientes infectados con SARS-CoV-2 se parece al de los pacientes con influenza4y parece diferente al observado en pacientes infectados con SARS-CoV-2.
Yang Pan y otros5Examinó muestras en serie (hisopos de garganta, esputo, orina y heces) de dos pacientes en Beijing y encontró que las cargas virales en las muestras de hisopado de garganta y esputo alcanzaron su punto máximo alrededor de 5 a 6 días después del inicio de los síntomas, las muestras de esputo generalmente mostraron cargas virales más altas que muestras de frotis de garganta.No se detectó ARN viral en muestras de orina o heces de estos dos pacientes.
La prueba PCR solo da un resultado positivo cuando el virus todavía está presente.Las pruebas no pueden identificar a las personas que pasaron por una infección, se recuperaron y eliminaron el virus de sus cuerpos.En realidad, solo entre el 30 % y el 50 % dieron positivo para la PCR en pacientes con neumonía por el nuevo coronavirus diagnosticada clínicamente.Muchos nuevos pacientes con neumonía por coronavirus no pueden ser diagnosticados debido a una prueba de ácido nucleico negativa, por lo que no pueden recibir el tratamiento correspondiente a tiempo.Desde la primera hasta la sexta edición de las directrices, basándose únicamente en el diagnóstico de los resultados de las pruebas de ácido nucleico, lo que causó grandes problemas a los médicos. El primer "denunciante", el Dr. Li Wenliang, oftalmólogo de Wuhan Central Hospital, está muerto.A lo largo de su vida se hizo tres pruebas de ácido nucleico en el caso de fiebre y tos, y la última vez dio positivo por PCR.
Después de la discusión de los expertos, se decidió aumentar los métodos de prueba de suero como un nuevo criterio de diagnóstico.Mientras que las pruebas de anticuerpos, también llamadas pruebas serológicas, pueden confirmar si alguien estaba infectado incluso después de que su sistema inmunológico haya eliminado el virus que causa el COVID-19.
Prueba rápida de anticuerpos StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM
La prueba de anticuerpos IgG/IgM ayudará a rastrear de una manera mucho más poblacional quién ha tenido la infección, porque muchos casos parecen contagiarse de pacientes asintomáticos que no pueden identificarse fácilmente.Una pareja en Singapur, el esposo dio positivo por PCR, el resultado de la prueba de PCR de su esposa fue negativo, pero los resultados de la prueba de anticuerpos mostraron que ella tenía anticuerpos, al igual que su esposo.
Los ensayos serológicos deben validarse cuidadosamente para asegurarse de que reaccionan de manera confiable, pero solo a los anticuerpos contra el nuevo virus.Una preocupación era que la similitud entre los virus que causan el síndrome respiratorio agudo severo y el COVID-19 podría dar lugar a una reactividad cruzada.El IgG-IgM desarrollado por Xue Feng wang6se consideró que podía usarse como una prueba en el punto de atención (POCT), ya que se puede realizar cerca de la cama con sangre por punción digital.El kit tiene una sensibilidad del 88,66% y una especificidad del 90,63%.Sin embargo, todavía hubo resultados falsos positivos y falsos negativos.
En la versión actualizada de China de la guía de diagnóstico y tratamiento para la nueva enfermedad por coronavirus (COVID-19)1, los casos confirmados se definen como casos sospechosos que cumplen cualquiera de los siguientes criterios:
(1) Muestras del tracto respiratorio, muestras de sangre o heces que dieron positivo para el ácido nucleico del SARS-CoV-2 mediante rt-PCR;
(2) La secuenciación genética del virus del tracto respiratorio, muestras de muestras de sangre o heces es altamente homóloga con el SARS-CoV-2 conocido;
(3) el anticuerpo IgM e IgG específicos del nuevo coronavirus en suero fueron positivos;
(4) El nuevo anticuerpo IgG específico de coronavirus en suero cambió de negativo a positivo o el anticuerpo IgG específico de coronavirus durante el período de recuperación es 4 veces más alto que durante el período agudo.
Diagnóstico y tratamiento de COVID-19
| Pautas | publicado | Criterios de diagnóstico confirmados |
| Versión 7 | 3 de marzo de 2020 | ❶ PCR ❷ SNG ❸ IgM+IgG |
| Versión 6 | 18 de febrero de 2020 | ❶ PCR ❷ SNG |
Referencia
1. Directrices para el diagnóstico y tratamiento de la nueva neumonía por coronavirus (versión de prueba 7, Comisión Nacional de Salud de la República Popular China, emitida el 3 de marzo de 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Uso exclusivo del protocolo de RT-PCR en tiempo real para la identificación de 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapur reclama el primer uso de la prueba de anticuerpos para rastrear las infecciones por coronavirus
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. Carga viral del SARS-CoV-2 en muestras de las vías respiratorias superiores de pacientes infectados 19 de febrero de 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Cargas virales de SARS-CoV-2 en muestras clínicas Lancet Infect Dis 2020 Publicado en línea el 24 de febrero de 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Desarrollo y aplicación clínica de una prueba rápida de anticuerpos combinados IgM-IgG para SARS-CoV-2
Diagnóstico de infección XueFeng Wang ORCID iD: 0000-0001-8854-275X
Hora de publicación: Mar-17-2020
