USO PREVISTO
El paso fuerte^®La prueba PROM es una prueba inmunocromatográfica de interpretación visual destinada a ser utilizada para la detección cualitativa de fibronectina fetal en las secreciones cervicovaginales.La presencia de fibronectina fetal en las secreciones cervicovaginales entre las 22 semanas, 0 días y las 34 semanas, 6 días de gestación esasociado con un riesgo elevado de parto prematuro.

TRODUCCIÓN
El parto prematuro, definido por el Colegio Estadounidense de Obstetras y Ginecólogos como el parto antes de la semana 37 de gestación, es responsable de la mayoría de la morbilidad y mortalidad perinatal no cromosómica.Los síntomas de amenaza de parto prematuro incluyen contracciones uterinas, cambios en el flujo vaginal, sangrado vaginal, dolor de espalda, malestar abdominal, presión pélvica y calambres.Las modalidades de diagnóstico para la identificación de la amenaza de parto prematuro incluyen el control de la actividad uterina y la realización de un examen cervical digital, que permite estimar las dimensiones del cuello uterino.Se ha demostrado que estos métodos son limitados, ya que la dilatación cervical mínima (< 3 centímetros) y la actividad uterina ocurren normalmente y no son necesariamente un diagnóstico de parto prematuro inminente.Si bien se han evaluado varios marcadores bioquímicos séricos, ninguno ha sido ampliamente aceptado para uso clínico práctico.

La fibronectina fetal (fFN), una isoforma de la fibronectina, es una glicoproteína adhesiva compleja con un peso molecular de aproximadamente 500 000 daltons.Matsuura y colaboradores han descrito un anticuerpo monoclonal llamado FDC-6, que reconoce específicamente III-CS, la región que define la isoforma fetal de fibronectina.Estudios inmunohistoquímicos de placentas han demostrado que fFN esconfinado a la matriz extracelular de la región que define la uniónde las unidades materna y fetal dentro del útero.

La fibronectina fetal se puede detectar en las secreciones cervicovaginales de mujeres durante el embarazo mediante el uso de un inmunoensayo basado en anticuerpos monoclonales.La fibronectina fetal está elevada en las secreciones cervicovaginales durante el embarazo temprano, pero disminuye de la semana 22 a la 35 en embarazos normales.No se comprende el significado de su presencia en la vagina durante las primeras semanas del embarazo.Sin embargo, puede reflejar simplemente el crecimiento normal de la población de trofoblastos extravellosos y la placenta.Se informa que la detección de fFN en las secreciones cervicovaginales entre las 22 semanas, 0 días y las 34 semanas, 6 días de gestación está asociada con el parto prematuro en mujeres embarazadas sintomáticas y entre las 22 semanas, 0 días y las 30 semanas, 6 días en mujeres embarazadas asintomáticas.

PRINCIPIO
El paso fuerte^®La prueba fFN utiliza tecnología de flujo capilar inmunocromatográfica en color.El procedimiento de prueba requiere la solubilización de fFN de un hisopo vaginal mezclando el hisopo en el tampón de muestra.Luego, el tampón de muestra mixto se agrega al pozo de muestra del casete de prueba y la mezcla migra a lo largo de la superficie de la membrana.Si fFN está presente en la muestra, formará un complejo con el anticuerpo anti-fFN primario conjugado con partículas coloreadas.Luego, el complejo se unirá a un segundo anticuerpo anti-fFN que recubre la membrana de nitrocelulosa.La aparición de una línea de prueba visible junto con la línea de control indicará un resultado positivo.

COMPONENTES DEL EQUIPO

MATERIALES REQUERIDOS PERO NO SUMINISTRADOS

PRECAUCIONES
■ Sólo para uso profesional de diagnóstico in vitro.
■ No lo use después de la fecha de vencimiento indicada en el paquete.No use la prueba si su bolsa de aluminio está dañada.No reutilice las pruebas.
■ Este kit contiene productos de origen animal.El conocimiento certificado del origen y/o estado sanitario de los animales no garantiza totalmente la ausencia de agentes patógenos transmisibles.Por tanto, se recomienda tratar estos productos como potencialmente infecciosos y manipularlos con las precauciones de seguridad habituales (no ingerir ni inhalar).
■ Evite la contaminación cruzada de las muestras utilizando un recipiente de recogida de muestras nuevo para cada muestra obtenida.
■ Lea todo el procedimiento detenidamente antes de realizar cualquier prueba.
■ No coma, beba ni fume en el área donde se manipulan las muestras y los kits.Manipule todas las muestras como si contuvieran agentes infecciosos.Observe las precauciones establecidas contra los peligros microbiológicos durante todo el procedimiento y siga los procedimientos estándar para la eliminación adecuada de las muestras.Use ropa protectora como batas de laboratorio, guantes desechables y protección para los ojos cuando se analicen las muestras.
■ No intercambie ni mezcle reactivos de diferentes lotes.No mezcle las tapas de las botellas de solución.
■ La humedad y la temperatura pueden afectar negativamente los resultados.
■ Cuando finalice el procedimiento de ensayo, deseche los hisopos con cuidado después de esterilizarlos en autoclave a 121 °C durante al menos 20 minutos.Como alternativa, se pueden tratar con hipoclorito de sodio al 0,5 % (o lejía doméstica) durante una hora antes de desecharlos.Los materiales de prueba usados ​​deben desecharse de acuerdo con las reglamentaciones locales, estatales y/o federales.
■ No utilice cepillos de citología con pacientes embarazadas.

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
■ El kit debe almacenarse a 2-30 °C hasta la fecha de caducidad impresa en la bolsa sellada.
■ La prueba debe permanecer en la bolsa sellada hasta su uso.
■ No congelar.
■ Se deben tomar precauciones para proteger los componentes de este kit de la contaminación.No lo use si hay evidencia de contaminación microbiana o precipitación.La contaminación biológica de los equipos de dosificación, contenedores o reactivos puede dar lugar a resultados falsos.

RECOGIDA Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS
■ Utilice únicamente hisopos estériles con punta de dacrón o rayón y mangos de plástico.Se recomienda utilizar el hisopo suministrado por el fabricante de los kits (los hisopos no están incluidos en este kit, para obtener información sobre pedidos, comuníquese con el fabricante o el distribuidor local, el número de catálogo es 207000).Los hisopos de otros proveedores no han sido validados.No se recomiendan hisopos con puntas de algodón o mangos de madera.
■ Las secreciones cervicovaginales se obtienen del fórnix posterior de la vagina.El proceso de recolección está destinado a ser suave.No se requiere recolección vigorosa o contundente, común para cultivos microbiológicos.Durante un examen con espéculo, antes de cualquier examen o manipulación del cuello uterino o del tracto vaginal, gire ligeramente la punta del aplicador a través del fórnix posterior de la vagina durante aproximadamente 10 segundos para absorber las secreciones cervicovaginales.Los intentos posteriores de saturar la punta del aplicador pueden invalidar la prueba.Retire el aplicador y realice la prueba como se indica a continuación.
■ Coloque el hisopo en el tubo de extracción, si la prueba se puede realizar de inmediato.Si no es posible realizar una prueba inmediata, las muestras de los pacientes deben colocarse en un tubo de transporte seco para su almacenamiento o transporte.Los hisopos se pueden almacenar durante 24 horas a temperatura ambiente (15-30°C) o 1 semana a 4°C o no más de 6 meses a -20°C.Se debe permitir que todos los especímenes alcancen una temperatura ambiente de 15-30°C antes de la prueba.

PROCEDIMIENTO
Lleve las pruebas, las muestras, el tampón y/o los controles a temperatura ambiente (15-30 °C) antes de su uso.
■ Coloque un tubo de extracción limpio en el área designada de la estación de trabajo.Agregue 1 ml de tampón de extracción al tubo de extracción.
■ Coloque el hisopo de la muestra en el tubo.Mezcle enérgicamente la solución girando el hisopo con fuerza contra el costado del tubo por lo menos diez veces (mientras está sumergido).Los mejores resultados se obtienen cuando la muestra se mezcla vigorosamente en la solución.
■ Exprima la mayor cantidad de líquido posible del hisopo apretando el costado del tubo flexible de extracción a medida que retira el hisopo.Al menos la mitad de la solución tampón de la muestra debe permanecer en el tubo para que se produzca una migración capilar adecuada.Coloque la tapa en el tubo extraído.
Deseche el hisopo en un contenedor adecuado para desechos biopeligrosos.
■ Las muestras extraídas pueden conservarse a temperatura ambiente durante 60 minutos sin afectar el resultado de la prueba.
■ Retire la prueba de su bolsa sellada y colóquela sobre una superficie limpia y nivelada.Etiquete el dispositivo con la identificación del paciente o del control.Para obtener el mejor resultado, el ensayo debe realizarse en el plazo de una hora.
■ Agregue 3 gotas (aproximadamente 100 µl) de muestra extraída del tubo de extracción al pozo de muestra en el casete de prueba.
Evite atrapar burbujas de aire en el pocillo de la muestra (S) y no deje caer ninguna solución en la ventana de observación.
A medida que la prueba comience a funcionar, verá que el color se mueve a través de la membrana.
■ Espere a que aparezcan las bandas de colores.El resultado debe leerse a los 5 minutos.No interprete el resultado después de 5 minutos.
Deseche los tubos de ensayo y los casetes de prueba usados ​​en un contenedor adecuado para desechos biopeligrosos.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS